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網(wǎng)站首頁(yè)技術(shù)文章 ◇ 超微量分光光度計(jì)安裝辦法簡(jiǎn)單敘述
超微量分光光度計(jì)安裝辦法簡(jiǎn)單敘述
更新時(shí)間:2019-03-26 點(diǎn)擊次數(shù):2330次
   超微量分光光度計(jì)在要求較高的分析測(cè)試工作中,紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的雜散光應(yīng)優(yōu)于0.05%,這樣可保證儀器有較寬的線(xiàn)性動(dòng)態(tài)范圍。雜散光通常在紫外區(qū)。實(shí)際測(cè)試時(shí),應(yīng)檢測(cè)整個(gè)光譜區(qū)的兩個(gè)端點(diǎn)的雜散光。紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的光度噪聲與掃描速度有很大關(guān)系。一般來(lái)講,掃描速度快的紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的噪聲也大。大屏幕紫外分光光度計(jì)的基線(xiàn)平直度是指每個(gè)波長(zhǎng)上的光速噪聲。測(cè)基線(xiàn)平直度時(shí),掃描速度用慢速。
 
  超微量分光光度計(jì)安裝環(huán)境的要求有:
 
 ?。?)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境要求:主要包括環(huán)境溫濕度、環(huán)境潔凈狀況、光及磁場(chǎng)干擾等。具體要求如下:
 
 ?、侪h(huán)境溫濕度  儀器應(yīng)安放在干燥的房間內(nèi),使用溫度為5~35℃,相對(duì)濕度不超過(guò)85%,應(yīng)控制在45%~65%,無(wú)冷凝。如有條件,應(yīng)配備去濕機(jī)(空調(diào))、濕度計(jì)等,在相對(duì)濕度較大的地區(qū)應(yīng)在儀器周?chē)乓恍└稍飫?/div>
 
 ?、跓o(wú)強(qiáng)光干擾及磁場(chǎng)干擾  室內(nèi)照明不宜太強(qiáng),且避免直射日光的照射。儀器應(yīng)盡量遠(yuǎn)離高強(qiáng)度的磁場(chǎng)、電場(chǎng)及發(fā)生高頻波的電器設(shè)備,防電磁干擾。
 
 ?、鄯乐垢g性氣體  避免在有硫化氫、:二氧化硫以及各種酸霧等腐蝕性氣體的場(chǎng)所使用,以免侵蝕儀器的約部件。
 
  在使用超微量分光光度計(jì)時(shí),需要注意一些使用的維護(hù)措施:
 
  1、使用的吸收池必須潔凈,并注意配對(duì)使用。量瓶、移液吸管均應(yīng)校正、洗凈后使用。
 
  2、取吸收池時(shí),手指應(yīng)拿毛玻璃面的兩側(cè),裝盛樣品以池體的4/5為度,使用揮發(fā)性溶液時(shí)應(yīng)加蓋,透光面要用擦鏡紙由上而下擦拭干凈,檢視應(yīng)無(wú)溶劑殘留。吸收池放入樣品室時(shí)應(yīng)注意方向相同。用后用溶劑或水沖洗干凈,晾干防塵保存。
 
  3、供試品溶液濃度除各該品種已有注明外,其吸收度以在0.3~0.7之間為宜。
 
  4、測(cè)定時(shí)除另有規(guī)定外,應(yīng)以配制供試品溶液的同批溶劑為空白對(duì)照,采用1cm石英吸收池,在規(guī)定的吸收峰±2nm以?xún)?nèi),測(cè)幾個(gè)點(diǎn)的吸收度或由儀器在規(guī)定的波長(zhǎng)附近自動(dòng)掃描測(cè)定,以核對(duì)供試品的吸收峰位置是否正確,并以吸收度zui大的波長(zhǎng)作為測(cè)定波長(zhǎng),除另有規(guī)定外吸收度zui大波長(zhǎng)應(yīng)在該品種項(xiàng)下規(guī)定的測(cè)定波長(zhǎng)±2nm以?xún)?nèi)。
 
  5、選用儀器的狹縫寬度應(yīng)小于供試品吸收帶的半寬度,否則測(cè)得的吸收度值會(huì)偏低,狹縫寬度的選擇應(yīng)以減少狹縫寬度時(shí)供試品的吸收度不再增加為準(zhǔn),對(duì)于大部分被測(cè)品種,可以使用2nm縫寬。
 
  超微量分光光度計(jì)為了測(cè)量不同方向上的光強(qiáng),上海光度計(jì)將燈具安裝在分布光度計(jì)上,以便于將其定位在規(guī)定的角度。分布光度計(jì)通常由一個(gè)用以支撐和定位燈具或光源以及光度探頭的機(jī)械裝置,連同一些獲取和處理數(shù)據(jù)的輔助設(shè)備組成。
 
  上海光度計(jì)基本上可以分為三種:
 
  一種使燈具繞兩根相互垂直的軸旋轉(zhuǎn),且兩根軸的交點(diǎn)是分布光度計(jì)光度中心的分布光度計(jì)這類(lèi)分布光度計(jì)通常使用一個(gè)單獨(dú)的且安裝在離光度中心距離足夠遠(yuǎn)的光度計(jì)探頭。
 
  一種分布光度計(jì),燈具僅繞一根軸旋轉(zhuǎn),燈具與光度探頭的相對(duì)運(yùn)動(dòng),光度探頭在穿過(guò)分布光度計(jì)的光度中心面內(nèi)相對(duì)于*根軸的角度并跨越*根軸,繞第二根軸作第二種旋轉(zhuǎn)。
 
  一種燈具*不動(dòng)的分布光度計(jì)。光度探頭繞兩根穿過(guò)分布光度計(jì)光度中心且相互垂直的軸旋轉(zhuǎn)。
 
  超微量分光光度計(jì)的使用方法
 
  1.選擇測(cè)定波長(zhǎng)
 
  2.接通電源開(kāi)關(guān),把黑體放在*格并置于光路中,合上樣品室暗箱蓋,模式處于T 狀態(tài)下預(yù)熱20分鐘;(斷開(kāi)光路)
 
  3.將裝有參比溶液和被測(cè)樣品的比色皿依次置于樣品室中(參比置于第二個(gè)格)。
 
  4.調(diào)0%T:將黑體置于光路中,T 應(yīng)為0%,否則調(diào)“0%T”按鍵使顯示為000。
 
  5.調(diào)T=100%:將參比溶液置于光路,T 應(yīng)為,否則調(diào)節(jié)“100%T”按鍵,使指針指在T=100%。(注意:不測(cè)定溶液吸光度時(shí),應(yīng)把黑體置于光路,防止光照長(zhǎng)時(shí)間照射檢測(cè)器)。
 
  6. 樣品的測(cè)定:把模式設(shè)置為A ,將樣品液依次處于光路中,分別記下被測(cè)樣品的吸光度。
 
  7.測(cè)量完畢,及時(shí)取出比色皿,用水洗干凈后倒置于濾紙上晾干,并將比色皿座架及暗箱用軟紙擦凈,關(guān)掉電源,儀器恢復(fù)至初始狀態(tài)。
 
  8.填寫(xiě)儀器使用記錄表
 
  大屏幕紫外分光光度計(jì)由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu),其吸收光能量的情況也就不會(huì)相同,因此,每種物質(zhì)就有其*的、固定的吸收光譜曲線(xiàn),UV-3802準(zhǔn)雙光束紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長(zhǎng)處的吸光度的高低判別或測(cè)定該物質(zhì)的含量。
 
  物質(zhì)的吸收光譜本質(zhì)上就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長(zhǎng)的光能量,相應(yīng)地發(fā)生了分子振動(dòng)能級(jí)躍遷和電子能級(jí)躍遷的結(jié)果。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu),其吸收光能量的情況也就不會(huì)相同,因此,每種物質(zhì)就有其*的、固定的吸收光譜曲線(xiàn),可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長(zhǎng)處的吸光度的高低判別或 測(cè)定該物質(zhì)的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ)。分光光度分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸 收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。
 
  超微量分光光度計(jì)的使用經(jīng)驗(yàn)
 
  1、幾乎所有的光譜分析儀器都是依據(jù)的朗伯-比耳定律。
 
  2、很多藥品要求相對(duì)誤差在1%以?xún)?nèi)。
 
  3、若石英比色皿QC的配對(duì)誤差為0.1%T,則給使用者帶來(lái)的分析誤差為0.5%。若QC的配對(duì)誤差為0.5%,則分析誤差為3%。
 
  4、大屏幕紫外分光光度計(jì)分析測(cè)試時(shí),注進(jìn)比色皿的溶液不要太滿(mǎn),一般到比色皿高度的2/3即可。
 
  5、一般的光電檢測(cè)器如硅光電池、光電管、光電倍增管有疲憊效應(yīng),應(yīng)避免長(zhǎng)時(shí)間照射、預(yù)熱時(shí),打開(kāi)樣品室蓋,防止光電檢測(cè)器受光疲憊。
 
  6、光譜帶寬以nm計(jì),狹縫寬度以mm計(jì)。
 
  7、波長(zhǎng)正確度在某種程度上,決定光度正確度。
 
  8、噪聲限制紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)對(duì)樣品分析濃度的下限,并直接影響儀器的信噪比。雜散光直接限制被分析測(cè)試樣品濃度的上限。
 
  9、雜散光對(duì)參比光束和樣品光束的影響是相同的。
 
  10、在要求較高的分析測(cè)試工作中,紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的雜散光應(yīng)優(yōu)于0.05%,這樣可保證儀器有較寬的線(xiàn)性動(dòng)態(tài)范圍。
 
  11、雜散光通常在紫外區(qū)。實(shí)際測(cè)試時(shí),應(yīng)檢測(cè)整個(gè)光譜區(qū)的兩個(gè)端點(diǎn)的雜散光。
 
  12、紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的光度噪聲與掃描速度有很大關(guān)系。一般來(lái)講,掃描速度快的紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的噪聲也大。
 
  13、大屏幕紫外分光光度計(jì)的基線(xiàn)平直度是指每個(gè)波長(zhǎng)上的光速噪聲。測(cè)基線(xiàn)平直度時(shí),掃描速度用慢速。
 
  14、紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的線(xiàn)性動(dòng)態(tài)范圍取決于儀器的雜散光與噪聲。
 
  15、為了得到更好的光度正確度,在分析過(guò)程中,特別要留意選擇試樣的zui大吸收峰處的波長(zhǎng)作為測(cè)試波長(zhǎng)。
 
  16、選擇光譜帶寬的原則是,在一定的實(shí)驗(yàn)條件下,測(cè)試吸光度隨光譜帶寬的變換,以獲得zui大吸光度值的光譜帶寬作為欲選擇的光譜帶寬。
 
  17、判定被測(cè)試樣是否有光解現(xiàn)象,首先要看測(cè)試數(shù)據(jù)的變化規(guī)律,對(duì)同一個(gè)試樣多次丈量,看其吸光度值是否都是向同一個(gè)方向變化,假如是,就可能有光解現(xiàn)象。
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